26.12.06
Инструкция
по применению внутрилабораторного контроля (ВЛК), содержащего HBsAg ВГВ
(ВЛК – HBsAg).
1. Назначение
ВЛК – HBsAg, предназначен для оценки воспроизводимости измерений HBsAg в
лабораториях. Использование ВЛК позволяет выявить ошибки при постановке имму-
ноферментного анализа (ИФА).
Рекомендуем ставить образец ВЛК – HBsAg при каждой постановке ИФА.
2. Общие положения
•
ВЛК – HBsAg получен от доноров и представляет собой лиофильно высушенную
сыворотку, содержащую HBsAg. Характеристики ВЛК представлены в паспорте.
•
ВЛК – HBsAg аттестован в иммуноферментных тест-системах отечественного и
импортного производства, не содержит антител к ВИЧ-1, 2 и ВГС.
3. Правила безопасности
При постановке иммуноферментного анализа следует соблюдать меры предосторож-
ности, принятые при работе с потенциально инфекционным материалом:
•
Работать в резиновых перчатках и респираторе.
•
Для предотвращения выброса материала при разгерметизации флаконов пробку
следует сначала слегка приоткрыть, а лишь затем извлечь полностью.
•
Не использовать поврежденные флаконы с ВЛК – HBsAg.
•
Все использованные материалы подвергать обработке раствором перекиси водо-
рода с массовой долей 6% с последующей выдержкой при комнатной температуре
не менее 2 часов.
4. Состав комплекта
Комплект состоит из 24 флаконов. Объем розлива ВЛК – HBsAg – 0,5 мл.
5. Условия хранения и транспортирования
1. ВЛК – HBsAg хранить и транспортировать при температуре (2-8)°С. Допускается транс-
портирование при температуре до 25°С в течение 3-х суток. Срок годности – 3 года.
2. Восстановленный раствор ВЛК – HBsAg хранится при температуре (2-8)°С в те-
чение 24 часов. Допускается однократное замораживание восстановленного рас-
твора ВЛК–HBsAg при минус 21±2°C под контролем температуры в низкотемпе-
ратурной камере с последующим хранением при указанной температуре до двух
недель.
6. Условия и порядок применения
•
Во флакон с лиофильно высушенной сывороткой вносят по 0,5 мл дистиллиро-
ванной воды одноразовым наконечником. Раствор тщательно перемешивают до
полного растворения сыворотки и выдерживают при комнатной температуре 15
минут. При использовании бывших в употреблении наконечников возможно вне-
сение протеаз, разрушающих белок, что может привести к снижению показателей
оптической плотности ВЛК.
•
Внесение образца ВЛК – HBsAg в лунки планшета осуществляется с помощью
одноразовых наконечников, не использовавшихся ранее, в количестве, указанном
в «Инструкции по применению» используемой тест-системы.
Page 2
D-0538
26.12.06
•
Учёт результатов по ВЛК – HBsAg следует проводить только в том случае, если
величины оптической плотности (ОП) положительного, отрицательного и слабо-
положительного контролей укладываются в пределы, регламентированные фарма-
копейной статьей на испытуемую тест-систему.
•
После проведения ИФА в рабочем журнале следует зафиксировать полученное
значение оптической плотности (ОП) для образца ВЛК-HBsAg.
7. Построение и анализ контрольной карты.
•
При накоплении не менее 10 результатов измерений ОП ВЛК-HBsAg в течение 10
дней (или 5 дней при постановках 2 раза в день) на одной и той же серии исполь-
зуемой тест-системы можно проводить статистическую обработку данных и их
анализ с построением контрольной карты (1). Рекомендуем проводить постановки
ИФА с использованием стандартов для контроля правильности.
•
Вычисляют среднее значение
n
ОП
ОПср
∑
=
;
среднеквадратическое отклонение
1
)
(
2
−
−
=
∑
n
ОПср
ОП
S
,
где n – число данных;
коэффициент вариации
CV=S/ОПср.×100%.
•
Если какой-нибудь результат отклоняется от среднего больше, чем на 3s, он дол-
жен быть исключен из расчета. После этого среднее значение, среднеквадратиче-
ское отклонение и CV рассчитать заново.
•
Рассчитанный CV ВЛК-HBsAg не должен превышать 14,2% при оценке воспро-
изводимости. При оценке сходимости ((не менее 4 значений) ОП ВЛК-HBsAg,
полученных при постановке в одном планшете) вычисленный CV ВЛК-HBsAg не
должен превышать 11,3% (2). При внутрилабораторном контроле качества анали-
за на HBsAg следует также руководствоваться показателями точности теста, ко-
торые приведены в «Инструкции по применению» к тест-системе. Если рассчи-
танный CV превышает допустимое значение, необходимо исследовать причины
плохой воспроизводимости и устранить их.
•
На контрольной карте в качестве центральной линии (ось Х) наносится ОПср.
ВЛК-HBsAg и параллельно ей две предупредительные границы карты ОПср. + 2s,
ОПср.- 2s и две контрольные границы ОПср + +3s, ОПср – 3s.
•
Получаемые результаты должны приблизительно поровну располагаться по обе
стороны от среднего значения, не должны непрерывно возрастать или убывать и
не должны очень сильно отклоняться от среднего значения (3).
8. Оценка результатов.
Оценку результатов исследований ВЛК-HBsAg проводят с использованием кон-
трольных правил, которые подробно описаны в Приказе № 45 МЗ РФ от 07.02.2000
(1). Контрольные правила применяются в определенной последовательности.
Если одно контрольное измерение оказалось за предупредительными границами
контрольной карты ОПср.±
2
s (предупредительное правило), то последовательно прове-
ряют наличие контрольных признаков 1
3
s, 2
2
s, R
4
s, 4
1
s, 10
x
(контрольные правила).
Если контрольные правила не нарушены, то результат анализа может быть выдан, но
необходимо провести тщательный анализ условий проведения анализа, чтобы устано-
вить причину выброса 1
2
s.
Если после выявления предупредительного признака 1
2
s обнаруживают хотя бы
одно нарушение контрольных правил, все результаты этого анализа считают неприем-
лемыми. Необходимо провести тщательную проверку всех условий ИФА, устранить
причину и провести анализ заново.
9. Литература.
1. Приказ № 45 МЗ РФ от 07.02.2000 «Правила внутри лабораторного контроля
качества количественных лабораторных исследований».
2. Нетесова И.Г., Ярославцева О.А., Антимонов А.В., Цой Л.В. «Результаты уча-
стия 285 лабораторий 13 регионов России в Программе внешней оценки качества ис-
следований HBsAg» // Клин. лаб. диагн. – 2006. – № 9. – С. 18-19.
3. Качество клинических лабораторных исследований (под редакцией В.В. Мень-
шикова). Москва, 2002.
10. За справками и консультацией обращаться:
в ЗАО «Вектор-Бест» по адресу:
630559, п. Кольцово Новосибирской области, Новосибирского района, а/я 121,
тел. (383) 332-92-49, 227-60-30, 227-67-64, тел/факс (383) 332-94-47, 332-94-44, 336-73-46
e-mail: vbobtk@ vector-best.ru, netesova@vector-best.ru

Отредактировано 456 (2009-05-19 18:33:55)